电影《天下第一镖局》讲述了清康熙年间，吴三桂死后，大将马宝为了将陈圆圆和其孙子护送归隐，开始寻求江湖势力保护，天下第一镖局——清平镖局意外担此重任，并经历了与多方势力的殊死混战，最终九死一生的故事。

清康熙年间，起兵反清的吴三桂死后，其残余势力每况愈下，大将马宝助贵妃陈圆圆等人归隐山林，为保路途平安，马宝不得不借“江湖势力”，杨六安设立的清平镖局被选中担此重任，走镖途中，杨六安一行遭到各路土匪和清兵将领的拦截，经历了多场生死血战，为恪守“人在镖在”的承诺九死一生。

马宝保护吴三桂遗孀前往贵州避难，消息走漏，马宝请永安镖局保镖走小路。自己带着敢死队，想引开敌人，正中马彪之计，敌兵全部围攻镖局而去，镖局最后用生命传递保镖最高境界就是保和平 。

皇帝驾崩，留下三道遗诏：让太子登基；让丞相监国；将太子生母淑妃赐死。

淑妃为了保命，说出天大的秘密：皇帝身受重伤，不能生育，太子并非皇家血脉，是从民间抱来的。

太子既非皇家血脉，那他生身父母是谁？于是，朝廷展开三堂会审，审理这天下第一案。